压缩空气微生物检测中如何实施无菌技术

在现代和工业工作环境中，人们90%以上的时间都是在封闭的空间中度过的，比如仓库、办公楼和工厂。在大多数室内环境中，空气中含有各种化学和微生物颗粒，通常被定义为室内污染物，可严重影响人体健康和产品质量(1)食品和饮料、医疗器械和制药制造商依赖他们预定的符合性测试来确认工作流管道中是否存在对产品的每日产量和安全性有害的问题。如果污染物存在于室内或室外的环境空气中，那么可以肯定的是，它们也存在于您的衣服、身体和设备上。当某些污染物(如细菌、酵母和霉菌)交叉污染监管和合规测试(如压缩空气系统的微生物测试)时，问题就出现了。无菌技术是一种旨在阻止这些影响的做法。

国际标准化组织(ISO)和美国药典(USP)在每个微生物程序部分都包括了测试时无菌技术的使用。该技术用于避免被测压缩空气样品与自己和周围环境的污染物交叉污染。如果操作不当，将会出现误报，并经常导致系统故障、累积成本和维护或重新测试的费用。这篇文章将着重于理解无菌技术的发展，实施和重要性压缩空气微生物试验．

评估样本位置

了解无菌技术需要了解微生物如何与动态环境相互作用。这些环境包括压缩机和使用点附近的环境空气、采样设备，最后是采样技术人员本身。根据压缩机的位置，它将吸入不同质量的环境空气。然后，该系统压缩空气，将其送入储罐，然后通过过滤器和干燥器系统（不需要，但强烈建议）进行分配，然后将其用于现场。一旦空气通过管道或管道输送到使用点，就可以对系统进行微生物污染测试。如果使用点取样区域周围的环境充满灰尘或其他类型的颗粒物，则环境空气中的这些颗粒很可能在取样时交叉污染微生物试验。例如，分拣、清洁或包装导致面粉、沙子、灰尘等高度絮凝物质的某些货物的设施会发现，由于周围环境的原因，进行简单的微生物测试几乎是不可能的。颗粒物充当细菌、酵母或霉菌的载体，并将其运送到新的位置。这可能包括用于取样的琼脂糖平板。微生物非常小，很容易从一个环境传播到另一个环境。像打喷嚏这样简单的事情就可以让数百万细菌穿过房间。做一个风险评估是一个很好的方法来评估使用点是否是一个必需的检测点。如果交叉污染的程度很有可能产生不准确的结果，因为不能以一定程度的清洁度取样，可能有必要将取样器预压在一个更“干净”的区域。这有助于实现更具有反射性的使用点结果。由于严格的法规和合规程序，制药和医疗设备操作可能不会遇到这些类型的问题。

评价自己

无菌技术的主要目的是消除微生物样品与外界微生物交叉污染的可能性。最大的问题是，人体充满了有益的和潜在的致病微生物。这些都存在于个体的内部和外部。几件简单的个人防护装备和一些消毒剂可以帮助防止交叉污染。

手套

第一种也是通常最有效的个人防护装备是干净、合适的检查手套（机械手套或布手套不一样）。不合身手套手指上的松散乳胶或腈会接触琼脂糖板表面并污染它。检查手套在您和取样介质（通常为非选择性琼脂糖）之间产生无机屏障。疾病控制和预防中心表示，保持双手清洁是我们可以采取的最重要步骤之一，以避免细菌传播到他人和多个表面（2）。在人们上完厕所、处理生肉、触摸粘膜、不讲卫生以及处理其他受污染的物体（门、旋钮、桌子）后，微生物会接触到手上。保护压缩空气中的微生物样本不被自己污染是确保报告结果准确的最佳方法。戴上手套并喷洒消毒剂（乙醇、漂白剂或异丙醇）后，不要接触工作表面以外的任何表面。人们通常在不知不觉中触摸眼睛、鼻子和嘴巴。如果存在交叉污染的可能性，在向前移动之前，更换手套或清洁手套表面。

实验室外套/围裙

同样重要的是要考虑你的衣服和武器作为潜在的污染源。干净、合身、可水洗或一次性的实验室外套是PPE的另一种必要形式，可消除在测试期间和采样设置期间降落或生活在衣服和皮肤上的任何微生物脱落到琼脂糖平板上。这些实验室涂层需要清洗；脏的实验服/围裙就像根本没有实验服一样有用。此外，如果有泄漏（酒精或消毒剂）或琼脂糖板掉落在你的身体上，实验室外套将保持你的清洁。

口罩

人们通常没有意识到有多少微生物占据着他们的嘴巴和鼻子。人类口腔内的微生物如此之多，以至于有一项研究以其命名:人类口腔微生物群。一张嘴就能容纳60多亿细菌，与地球上73亿人口相比，这是一个惊人的数字。每次我们说话、咳嗽、打喷嚏、呼气时，唾液和微生物都会离开我们的口鼻。足够大多数这些水滴降解,微生物无法生存在他们长,但研究表明,一个喷嚏后,微生物可以生存的生物气胶(打喷嚏或咳嗽的液体)45分钟(4)。由于这个原因,它是重要的捂住鼻子和嘴打开微生物板块如琼脂糖。

消毒液

消毒剂是消除或减少物体或表面有害微生物的解决方案。这与杀菌过程不同，杀菌过程会杀死所有微生物。几个世纪以来，酒精一直被用作消毒剂。最常见的酒精基消毒剂是乙醇和异丙醇。由于某些微生物(如细菌)的结构，暴露在70%乙醇或异丙醇溶液中会导致生物体的外细胞膜降解、解体，最终死亡。当酒精浓度高于或低于70%时，这种情况就不会发生。10%漂白剂(次氯酸钠)的溶液像酒精一样降解微生物的蛋白质，导致细胞死亡。对手套表面、工作台和冲击取样器内部进行简单的喷涂，就足以在使用点之间进行正确的清洁，以获得准确的结果。

在使用无菌技术测试压缩空气微生物样品时，这些基本PPE项目是必要的，以避免交叉污染。如果技师有胡须或长发，建议始终使用发网。在使用消毒喷雾剂和准备取样用压缩空气时，眼睛保护对于保护眼睛非常重要。

无菌技术培训

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充分的无菌技术培训包括许多组成部分。这些包括准备测试环境、个人准备和产品操作（5）。表1是对Brown图表的改编，该图表概述了压缩空气（撞击取样器）微生物测试的培训准则，符合ISO 8573 - 7．培训标题的目的是对绩效进行评分，并确定未来再培训的重点领域。该表包含了正在评估的组件，基于标准描述的评级，以及它们造成污染的可能性，需要改进或在实践中是可接受的。

需要评估的部件包括个人防护设备、消毒剂和清洗规程、取样设备的操作、设备的使用、最终产品的检验以及最终样品的包装以便运输或加工。这些都包含了无菌技术协议，将限制或消除从取样设备到平板分析的任何交叉污染变量。应详细阅读并调整标题以适应所使用的取样设备。协议的大部分内容足够广泛，可以被所有技能水平的人普遍执行。建议在对无菌技术进行讨论并理解后，对技术员的技能进行基线评估。这一基线将使培训师了解哪些技能需要改进，哪些概念需要澄清。由于大多数清洁和费力的方案会随着时间的推移而退化，建议每两年进行一次评估，以评估技术的发展情况。

压缩空气系统中的微生物可以表明可能存在与进水泵附近的废水相关的病原体，管道分布的预防性维护不力，以及协议完整性的丧失。当涉及到确保人员充分准备从任何设施系统中取样微生物时，彻底的、有文件记录的培训是至关重要的。压缩空气系统是独特的;ISO和USP有专门设计的微生物污染物分析方案，利用阴性对照、盲板和无菌技术。如果处理得当，结果会清晰地描绘出采样当天的情景。如果严格遵循ISO 8573-7标准，则会有一个无菌空白(伴随检测样品的阴性对照，但从未打开)，两个测试技术员无菌技术的盲板，取样前后，以及实际使用点的样品。如果任何一个ISO 8573-7百叶窗含有污染，则很难确定是哪个系统污染了测试板，如果测试板也有污染(环境环境或压缩空气)。更具体地说,如果一个失明之前污染2集落形成单位(CFU)和接入点测试板含有1个CFU,而盲目清晰可见的污染后,现在存在一定程度的审查必须放置在接入点的数据。不能保证测试板上的污染与前盲板上的污染不一样。同样，如果百叶窗被污染但压缩空气样本没有被污染，则取样技术员的无菌培训应重新评估和评估。 The ideal situation is clean blinds and an under-limit test plate report.

总之，对无菌技术人员进行适当的培训是不可替代的。微生物学结果可以指示是否充分遵守规程或是否需要进行再培训。无论哪种情况，文档和半年一次的培训评估都有助于保持技术和准确的压缩空气微生物报告。被污染的百叶窗和压缩空气微生物样品的成本可能导致重新检测费用和人工成本，假阳性结果可能导致使用点关闭，如果发布召回，产品完整性下降。

关于作者

Maria Sandoval在微生物和分子生物学领域有超过15年的经验。她的实地工作包括分析从俄罗斯贝加尔湖深处到切尔诺贝利50公里禁区的极端微生物。此外，她还与疾病控制中心和DSHS一起工作，分析和诊断病人的微生物群。她在劳伦斯伯克利国家实验室、国家卫生服务部门和德克萨斯大学MD安德森癌症中心的任职使她成为微生物检测方面的领先专家。作为Trace Analytics的微生物学家和实验室主任，她负责微生物测试和程序开发。

Trace Analytics是一家A2LA认可的实验室，专门从事食品和饮料生产设施的压缩空气和气体测试。使用ISO 8573取样和分析方法，他们对压缩空气中发现的颗粒(0.5-5微米)、水、油气溶胶、油蒸气和微生物污染物的实验室测试。在过去的29年里，他们一直坚持最高的行业健康和安全标准，按照ISO、SQF、BRC和FDA的要求在全球范围内提供毫不妥协的质量。访问www.AirCheckLab.com

阅读类似的文章压缩空气净化请访问//www.ghtac.com/technology/air-treatment．

参考文献

1. 谭布里尼，多尼加，V.，马尔凯蒂，m.g.等。(2017年7月17日)。化学和微生物实验室常用的六种表面微生物沉积和污染的研究。Int。[j] .环境与公共卫生，12(7):8295-8311.]
2. 疾病控制和预防中心。让我看看科学——为什么要洗手？2019年4月15日从，https://www.cdc.gov/handwashing/why-handwashing.html?s_cid=ostltsdyk_cs_679．
3. 人类口腔微生物组数据库。(无日期)。人类的口腔微生物。于2019年4月15日从http://www.homd.org/．
4. 鲍勒(2017,6月20日)。咳嗽和打喷嚏时的细菌可以在空气中存活45分钟。于2019年4月18日从https://www.sciencealert.com/bacteria-in-your-coughs-and-sneezes-can-stay-alive-in-the-air-for-up-to-45-minutes．
5. Brown, m.c.， Conway, J, Sorensen, T.D.(2006年12月15日)。无菌技术评分标准的制定和实施。Am J Pharm Educ. 70